產(chǎn)品英文名稱:HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 產(chǎn)品中文名稱:人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基 CCGmHuM 人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基根據(jù)干細胞的生長需要,培養(yǎng)基包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機和無機化合物、激素、生長因子、微量礦物質(zhì)、血清替代物以 及其他補給成分。非常適用于培養(yǎng)哺乳類干細胞,包括臍帶干細胞,骨髓干細胞,脂肪干細胞等 間充質(zhì)干細胞。產(chǎn)品嚴格無菌,無病毒和支原體,性能穩(wěn)定,使用 該培養(yǎng)基能使干細胞在理想營養(yǎng)平衡狀態(tài)下進行多代擴增而不發(fā)生分化(至少10代以內(nèi))。 人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基產(chǎn)品特點: 1.Chemically-Defined 2. Serum-Free 3. Xeno-Free 4.No Plate Coating Necessary 5.Perform Better than FBS Medium HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基實驗操作手冊: 1. 材料和試劑準備 耗材:細胞培養(yǎng)瓶 corning cellbind flask 25cm2 flask:corning 3289 75cm2 flask:corning 3290 175cm2 flask:corning 3292 試劑:原代人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基CCGmHuM Medium( HZ0201M): Basal medium(HZ0202M ,450ml)+Supplement(HZ0203M,50ml)+Adherent factor(HZ0205M ,25X) *培養(yǎng)基配制:將Supplement在4℃溶解,溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中;原代培養(yǎng)時需加入1X 的Adherent factor(Adherent factor:*培養(yǎng)基的體積比為1:24比例配制)。 傳代用人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基CCGmHuM Medium( HZ0201M): Basal medium(HZ0202M ,450ml)+Supplement(HZ0203M ,50ml) *培養(yǎng)基配制:將Supplement在4℃溶解,溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中。 細胞分離試劑: TrypLE™ Select CTS™(Gibco-A12859-01,100ml) 2. 方法 原代培養(yǎng)(臍帶來源的MSC) 1.1 制備組織細胞團:用手術(shù)器械剝離臍帶血管獲得華通氏膠體,洗凈血細胞,制備成1-4mm3組織小團塊。 1.2 接種:將組織細胞團塊按5-10mg/cm2均勻接種至細胞培養(yǎng)瓶中。 1.3 細胞維持:實時觀察細胞生長狀況,適當換液,待原代細胞形成的克隆達到約100個細胞時,可以進行細胞消化、細胞凍存或傳代培養(yǎng)。 我們推薦細胞3-4天換液,原代培養(yǎng)時間大概為9-13天! 細胞傳代、擴增培養(yǎng) 2.1細胞消化 待細胞匯合度約75%-80%左右時(9-13天左右),棄掉培養(yǎng)基,用DPBS(w/o Ca2+Mg2+)潤洗一遍,加入適量的細胞分離液覆蓋細胞表面,37度,2-5min。待細胞開始脫落時,用適量的*培養(yǎng)基即刻終止消化,細胞離 心,300 g,8 min,棄去上清,用*培養(yǎng)基重懸細胞沉淀。 2.2細胞傳代 按1.5-4*103/cm2接種到細胞培養(yǎng)瓶中,放入二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 我們推薦每3天左右進行細胞傳代培養(yǎng),判定傳代時間為細胞在培養(yǎng) 瓶中匯合度約為75%-80%,不能長得過滿! 如果您在使用CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 人間充質(zhì)干細胞無血清培養(yǎng)基過程中,有任何技術(shù)問題,我們開通了HY STEMCELL技術(shù)團隊,歡迎您發(fā)郵件到pm@hystemcell.com 進行交流溝通,我們的目標是:推動中國干細胞技術(shù)走向產(chǎn)業(yè)和臨床!
產(chǎn)品應用領域:
適用于人及哺乳類來源的間充質(zhì)干細胞或成體干細胞的培養(yǎng),包括臍帶間充質(zhì)干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞及脂肪干細胞 |