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淺析伯樂丙烯酰胺的主要優(yōu)點(diǎn)
點(diǎn)擊次數(shù)：1600 更新時(shí)間：2014-12-23
伯樂丙烯酰胺是一種常用的電泳基質(zhì)，由丙烯酰胺與共單體交聯(lián)劑的自由基聚合而成?？煽康碾娪窘Y(jié)果取決于這一反應(yīng)的可重復(fù)性，高純度的起始試劑是影響凝膠質(zhì)量的一個重要因素。伯樂丙烯酰胺經(jīng)過嚴(yán)格的純化和測試，具有均衡聚合所需的一切品質(zhì)。丙烯酰胺有3種形式，可滿足每個實(shí)驗(yàn)室的需要：1.丙烯酰胺粉劑— 丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺粉劑，濃度和丙烯酰胺/ bis 比率可調(diào)。2.預(yù)混合丙烯酰胺/ 甲叉雙丙烯酰胺粉劑— 含量固定的Bio-Rad 99.9% 超純丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺。直接加入 一定量的超純水即可配制成30-50% 的儲存液。3.丙烯酰胺溶液— 可直接使用，有2 種濃度（30% 和40%），3 種丙烯酰胺/ bis 比（19 :1，29 :1 和37.5 :1）
伯樂丙烯酰胺有以下優(yōu)點(diǎn)：
①伯樂丙烯酰胺是由丙烯酰胺和N，N'甲叉雙丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝膠有 格子是帶有酰胺側(cè)鏈的碳-碳聚合物，沒有或很少帶有離子的側(cè)基，因而電滲作用比較小，不易和樣品相互作用。
?、谟捎诓畼繁０肥且环N人工合成的物質(zhì)，在聚合前可調(diào)節(jié)單體的濃度比，形成 不同程度交鏈結(jié)構(gòu)，其空隙度可在一個較廣的范圍內(nèi)變化，可以根據(jù)要分離物質(zhì)分子 的大小，選擇合適的凝膠成分，使之既有適宜的空隙度，又有比較好的機(jī)械性質(zhì)。一般說來，含丙烯酰胺7-7.5%的凝膠，機(jī)械性能適用于分離分子量范圍不1萬至100萬物 質(zhì)，1萬以下的蛋白質(zhì)則采用含丙烯酰胺15-30%的凝膠，而分子量特別大的可采用含 丙烯酰胺4%的凝膠，大孔膠易碎，小孔膠則難從管中取出，因此當(dāng)丙烯酰胺的濃度增 加時(shí)可以減少雙含丙烯酰胺，以改進(jìn)凝膠的機(jī)械性能。
?、墼谝欢舛确秶畼繁０穼岱€(wěn)定。凝膠無色透明，易觀察，可用檢測儀直接測定。
?、懿畼繁０肥潜容^純的化合物，可以精制，減少污染。合成伯樂丙烯酰胺的原料是丙烯酰胺和甲撐雙丙烯酰胺。丙烯酰胺稱單體，甲撐雙丙烯酰胺稱交聯(lián)劑，在水溶液中，單體和交聯(lián)劑通過自由基引發(fā)的聚合反應(yīng)形成凝膠。
在伯樂丙烯酰胺形成的反應(yīng)過程中，需要有催化劑參加，催化劑包括引發(fā)劑和 另速劑兩部分。引發(fā)劑在凝膠形成中提供始自由基，通過自由基的傳遞，使丙烯酰胺 成為自由基，發(fā)動聚合反應(yīng)，加速劑則可加快引發(fā)劑放自由基的速度。聚丙烯酰胺凝膠電泳可分為連續(xù)的和不連續(xù)的兩類，前者指整個電泳系統(tǒng)中所用緩沖 液，pH值和凝膠網(wǎng)孔都是相同的，后者是指在電泳系統(tǒng)中采用了兩種或兩種以上的緩 沖液，pH值和孔徑，不連續(xù)電泳能使稀的樣品在電泳過程中濃縮成層，從而提高分辨能力。
