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人PBMC中免疫細胞分類

更新時間:2014-02-07 點擊次數(shù):6968

    人外周血作為免疫系統(tǒng)來研究時,通常需要通過密度梯度離心去除紅細胞。zui常用的是利用Ficoll Paque將全血分成高于和低于1.077g/ml兩種密度的組分。
    外周血單個核細胞(PBMC)密度較小,位于Ficoll上層,也稱為buffy coat。紅細胞和包括中性粒細胞和嗜酸性粒細胞在內(nèi)的多形核細胞(PMNs)密度大于1.077g/ml可被除去。嗜堿性粒細胞的密度在1.077g /ml左右,部分仍然存在于PBMC組分中。
    PBMCs 包括淋巴細胞(T細胞、B細胞和NK細胞)、單核細胞和DC細胞。在人類中,這些細胞群的比例在個體中有所差異。通常PBMCs中,淋巴細胞占70 – 90%,單核細胞占10 – 30%,而DC細胞則只占1 -2%。在淋巴細胞中,CD3+ T細胞占70 – 85%(在PBMCs中占45 – 70%),B細胞占5 – 20%(在PBMC中zui多15%),NK細胞占5 – 20%(在PBMC中zui多15%)。
    CD3+ T細胞由CD4+ T細胞(在PBMCs中占25 – 60%)和CD8+ T細胞(在PBMCs中占5 – 30%)組成,兩者比例在2:1左右。CD4+ T細胞和CD8+ T細胞可進一步分為幼稚細胞、抗原接觸的中樞記憶細胞、效應(yīng)記憶細胞和效應(yīng)細胞亞群。
    CD4+ T細胞為輔助性T細胞,根據(jù)特異性細胞因子、表面分子或轉(zhuǎn)錄因子可進一步分為各種功能亞群,包括調(diào)節(jié)性T細胞、Th1、Th2、Th17、Th9、Tfh 和Tr1等亞型。而近年來發(fā)現(xiàn)CD8+ 細胞毒性T細胞的表型和功能差異非常大,也許有200種功能表型,因此對其的研究會非常復(fù)雜。
    在外周血中,B細胞分為過渡期、幼稚、記憶亞群以及漿細胞。DC細胞包括漿細胞樣DC細胞(pDC)和髓系衍生的DC細胞(mDC)。單核細胞可分為經(jīng)典單核細胞和非經(jīng)典CD16+促炎性單核細胞,后者在單核細胞中zui多占10%,具有*的功能。
    人類免疫系統(tǒng)的研究著重于對PBMCs的表型和功能研究。為了通過PBMCs研究人的免疫系統(tǒng),了解外周血中存在的細胞種類,以及其如何在組織中分化和發(fā)揮功能是很重要的。zui后,熟悉細胞表面和胞內(nèi)表型鑒定、以及的檢測方法也是非常關(guān)鍵的。

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